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转基因玉米BT11、T25品系环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立

  登记号:G2017-552

  登记年:2017

  成果名称:转基因玉米BT11、T25品系环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立

  成果类别:应用技术-方法类

  项目来源:单位自行立项项目

  专业类别:食品安全-食品检测

  起止日期:2016年7月 至2017年7月

  主要完成单位:辽宁出入境检验检疫局

  主要完成人:徐君怡

  适用范围:农、林、牧、渔业

  成果摘要:" 本研究是辽宁局科技计划项目,项目编号LK07-2016。

  本研究采用环介导等温扩增(LAMP)快速检测技术:根据转基因玉米品系外源基因和玉米边界序列设计特异性内引物和外引物各一对,特异性识别靶序列上的六个独立区域,利用Bst酶启动循环链置换反应,在玉米品系特异靶序列启动互补链合成,在同一链上互补序列周而复始形成有很多环的花椰菜结构的茎-环DNA混合物;从dNTP析出的焦磷酸根离子与反应溶液中的Mg2+结合,产生副产物(焦磷酸镁)形成乳白色沉淀,加入显色液,即可通过颜色变化观察判定结果。

  建立了适用于食品中转基因玉米Bt-11、T25品系特异性检测标准方法,操作简单,不依赖昂贵仪器,检测时间在1小时左右,方法灵敏度达到0.5%,性能参数等同于传统PCR方法或荧光定量PCR方法,能够应用于检验检疫实际工作,尤其适用于大量样品快速初筛和各种基层实验室食品品质监控。"


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