登记号: G2017-001
登记年: 2017
成果名称: 细菌检测相关的分子生物学计量溯源技术研究
成果类别: 应用技术-方法类
项目来源: 国家级资助项目
专业类别: 计量-化学计量
起止日期: 2013年1月 至2015年12月
主要完成单位: 上海市计量测试技术研究院
主要完成人: 刘刚
适用范围: 科学研究、技术服务和地址勘查业
成果摘要:
本项目通过研究重组质粒DNA设计、ATP纯化以及可溯源定值等关键难题,研制系列标准物质,用于建立工作标准、结果质量控制,并研究校准装置,制定校准规范,开展计量校准工作。项目共完成19个质粒DNA标准物质的研制,完成质粒设计、提取纯化、质粒序列正确性验证、均匀性检验、多家定值,稳定性验证等一系列工作;研究了多种DNA定值方法,包括紫外分光光度法、电感耦合等离子体质谱法以及高灵敏度数字PCR法,实现良好的方法一致性,分析了方法不确定度主要来源,从而实现高准确度、高可靠性的质粒DNA标准物质定值。经过最终不确定度评估,质粒DNA标准物质量值不确定度平均低于5%。完成一种三磷酸腺苷(ATP)纯度标准物质和溶液标准物质:完成ATP的纯化;完成ATP纯度标准物质和溶液标准物质的均匀性、稳定性检验;完成ATP纯度标准物质中的杂质鉴定;开展了ATP荧光分析仪的校准技术研究,实现了手持式分析仪的稳定性、准确度等指标的检测。开展了微孔板化学发光分析仪校准规范的校准方法研究,研制了LED光源模拟生物发光板对微孔板化学发光分析仪的示值误差、重复性、交叉污染、灵敏度、通道差异和线性相关系数计量特性进行校准。