登记号: G2017-278

　　登记年: 2017

　　成果名称: 玉米褪绿斑驳病毒分子检测标记的发掘与评价

　　成果类别: 应用技术-方法类

　　项目来源: 质检总局项目

　　专业类别: 出入境检疫-出入境植物检疫

　　起止日期: 2014年1月 至2015年12月

　　主要完成单位: 上海出入境检验检疫局

　　主要完成人: 杨翠云

　　适用范围: 农、林、牧、渔业

　　成果摘要:
    本试验利用收集的国内外MCMV的6个分离物，在计算机筛选出的非CP基因的3段保守基因标记区段内，自行设计引物和探针，分别建立了检测MCMV的普通RT-PCR、金胶RT-PCR、TaqMan实时荧光RT-PCR、SYBR Green ⅠRT-PCR和RT-LAMP等多种分子生物学检测方法，建立的各种分子生物学检测方法都具有很高的特异性和灵敏度。
    本研究首次采用金纳米结合RT-PCR方法，建立了金胶RT-PCR方法，建立的方法灵敏度高，试验中不用跑电泳，直观肉眼观察颜色反应即可判定结果，目前尚未见金胶RT-PCR检测MCMV的报道。本研究自行设计了5条特异性引物，建立了检测MCMV的RT-LAMP方法，仅需要一台恒温水浴锅可判定实验结果，操作方便，特别适合口岸一线人员对进境样品进行病毒的初筛。本研究采用胶体金和MCMV的单抗和多抗，研制了胶体金免疫试纸条，其特异性和灵敏度都好。