登记年:2017

　　

　　成果名称:进境水生动物及其产品中人畜共患病原的识别与预警技术

　　

　　成果类别:-应用技术

　　

　　项目来源:质检总局项目

　　

　　专业类别:出入境检疫-出入境动物检疫

　　

　　起止日期:2015年5月 至2016年12月

　　

　　主要完成单位:机场检验检疫局

　　

　　主要完成人:柏建山

　　

　　适用范围:农、林、牧、渔业

　　

　　成果摘要:本研究主要应用于出入境水生动物和水产品病原病原检测领域，另外可应用于国内水产养殖行业的疾病检测和防控。技术原理是根据病原rRNA的基因序列的特异性，建立特异性荧光定量PCR方法；环介导等温扩增技术是一种体外的基因扩增技术,利用实时荧光技术可以将LAMP反应可视化，进行实时监控，根据扩增曲线判断结果。

　　

　　（1）建立了无乳链球菌的实时定量PCR方法

　　

　　根据无乳链球菌16S-23S rRNA基因间区序列（ISR）设计引物序列，分别测定该荧光定量PCR的特异性、灵敏性、重复性和稳定性，结果表明所建立的荧光定量PCR检测方法具有很好的稳定性和重复性。

　　

　　（2）建立了异尖线虫恒温实时荧光检测方法

　　

　　建立异尖线虫的恒温实时荧光法反应体系，灵敏度可达1fg/μL，反应时间短，30-45分钟内便可完成对简单异尖线虫和典型异尖线虫的检测。

　　

　　（3）建立了颚口线虫的恒温实时荧光检测方法

　　

　　根据棘颚口线虫的ITS2特异性基因，建立了棘颚口线虫的LAMP检测方法，该方法具有灵敏度高、特异性好、方便和快速等优点，灵敏度可达到1 fg/μL，反应时间短。

　　

　　（4）建立了裂头蚴的特异性检测方法