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牛结节疹病AlphaLISA检测方法及标准化试剂的研究

  登记号:G2017-154 

  
  登记年:2017
  
  成果名称:牛结节疹病AlphaLISA检测方法及标准化试剂的研究
  
  成果类别:应用技术-方法类
  
  项目来源:质检总局项目
  
  专业类别:出入境检疫-出入境动物检疫
  
  起止日期:2014年1月 至2016年12月
  
  主要完成单位:重庆出入境检验检疫局技术中心
  
  主要完成人:聂福平
  
  适用范围:农、林、牧、渔业
  
  成果摘要:牛结节疹病(LSD)是由痘病毒科、山羊痘病毒属的牛结节疹病毒引起牛的一种重要传染病。各种牛均易感,死亡率能达到3%~85%。被OIE列为必报的传染病。项目针对牛结节疹病毒开展研究,建立了羊痘病毒属病毒的单重、多重TaqMan MGB荧光定量PCR方法,并研制了相应的检测试剂盒,方法特异、灵敏、简便、快速;进行了牛结节疹病毒O132蛋白的原核和真核表达,以及单克隆抗体的初步筛选。主要成果为:1)建立了SPPV的TaqMan MGB荧光PCR方法。(2)建立了GTPV的TaqMan MGB荧光PCR方法。(3)建立了LSDV的TaqMan MGB荧光PCR方法。(4)建立了羊痘病毒属病毒的多重TaqMan MGB 荧光PCR方法,可特异的鉴别检测LSDV、SPPV、GTPV,最低检测敏感度为SPPV 2.67×10 copies/μL,GTPV 3.29×10 copies/μL,LSDV 1.48×10 copies/μL 。(5)对LSDV的O132蛋白进行了原核表达和真核表达,成功表达了O132蛋白。通过研究,申请并获得国家发明专利3项,发表论文1篇,培养研究生2名。


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